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Trabalhos de Estudantes

Trabalhos de Biologia - 11º Ano

 

Extracção do DNA de Células Vegetais

Autores: Bárbara Resende, Helena Silva e Rita Silvestre

Escola: Escola EB 2,3/S de Ourique

Data de Publicação: 20/12/2007

Resumo do Trabalho: Trabalho experimental sobre a Extracção do DNA de Células Vegetais, realizado no âmbito da disciplina de Biologia (11º ano).
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Extracção do DNA de Células Vegetais

Introdução:

O DNA é uma biomolécula existente em todos os seres vivos (também em alguns vírus), que codifica a informação necessária à constituição dos organismos. Nas células eucarióticas de plantas, fungos e animais, o DNA encontra-se no núcleo.

A extracção e análise de DNA é uma técnica laboratorial muito utilizada na investigação científica e em diversos estudos taxonómicos e forenses (testes de paternidade e identificação de indivíduos).

O seu principal papel é armazenar as informações necessárias para a construção das proteínas e RNA. Os segmentos de ADN que são responsáveis por carregar a informação genética são denominados genes. O restante da sequência de ADN tem uma importância estrutural ou está envolvido na regulação do uso da informação genética.

A dupla hélice ADN (um dos objectivos da experiência era conseguir visualiza-la ao microscópio) é estabilizada por pontes de hidrogénio entre as bases presas às duas fitas. As quatro bases são adenina, citosina, guanina e timina.

O objectivo desta actividade experimental era conseguir visualizar o DNA das células vegetais, neste caso o Kiwi. Para tal tínhamos que destruir os tecidos e separar os fragmentos celulares por filtração. A extracção de DNA completa-se adicionando etanol frio, que provoca a sua precipitação.

 

Preparação do material para ser iniciada a experiência.

100ml de H2O

10ml de detergente da loiça

 3g de NaCl

 

 

Descascar e corta o kiwi em pequenos cubos com a ajuda do bisturi.

 

 

 

 

 

 

 

Esmagar o kiwi no almofariz

O preparado ficou a repousar durante cerca de 15m.

Filtrou-se o preparado, de forma a obter 20ml de líquido.

Seguidamente adicionou-se ao preparado filtrado 20ml de etanol frio

 

 

 

 

 

 

 

 

Os filamentos que se formam são de DNA

 

Formação de duas camadas distintas

 

 

Material Utilizado:

 . Kiwi

 . Almofariz

 . Bisturi

 . Gase (ou pano)

 . Gobelé de 100ml

 . Água destilada

 . Detergente da loiça

 . Cloreto de Sódio

 . Etanol frio 96%

 . Fucsina básica

 . MOC (microscópio óptico composto)

Resultados/Conclusão:

Para conseguirmos realizar esta experiência utilizamos o sal, este como tem uma grande carga , quimicamente vai fazer com que se dêem reacções nas quais os iões se vão separar, o que depois vai ter uma influência ao nível do DNA. O detergente uma vez que tem afinidade com as gorduras separa-as.

 Para libertar o conteúdo do DNA tivemos que esmagar o kiwi uma vez que o DNA estava dentro das células e estas antes do processo de esmagamento estavam intactas, e assim não podíamos ver o DNA.

Seguidamente com a ajuda da fucsina básica (indicador que tem a função de corar o material genético, e que é utilizado em citologia e bacteriologia, é uma mistura de Rosalina, pararosalina e mangentaII). No entanto devido ao facto de a fucsina se encontrar estragada quando fomos ver ao microscópio o resultado da experiência estava tudo branco ao invés de estar assim avermelhado. E tinha um cristal avermelhado resultado do facto de a fucsina estar estragada. De modo que a experiência não correu bem. Apenas conseguimos visualizar vários aglomerados de moléculas de DNA, isto a olho nu.

 

Resultado da observação ao microscópio de uma amostra retirada do tubo de ensaio proveniente da experiência do DNA da célula do kiwi, com uma ampliação de 20%.

 

Cristal proveniente da fucsina estragada

Bibliografia:

Ficha dada pela professora na aula.

http://pt.wikipedia.org/wiki/DNA

http://pt.wikipedia.org/wiki/Fucsina_b%C3%A1sica

http://www.acofarma.com/pdf/htm/f063.htm

 

 

 

 

 

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